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微生物誘變技術(shù)通過人工干預(yù)誘發(fā)基因突變,為篩選高產(chǎn)、抗逆等優(yōu)良菌株提供了可能,但誘變后的菌株常存在遺傳不穩(wěn)定問題,因此穩(wěn)定性檢測(cè)與科學(xué)的傳代培養(yǎng)至關(guān)重要。?穩(wěn)定性檢測(cè)需結(jié)合表型觀察與分子水平分析。連續(xù)傳代觀察是基礎(chǔ)方法,將誘變后的目標(biāo)菌株在適宜條件下連續(xù)傳代5-10次,每代測(cè)定其關(guān)鍵性狀,如高產(chǎn)菌株的產(chǎn)物合成能力、抗逆菌株的環(huán)境耐受閾值等。例如,誘變后的產(chǎn)酶菌株需每代檢測(cè)酶活變化,若連續(xù)3代酶活波動(dòng)小于5%,可初步判定為穩(wěn)定菌株。分子層面可通過PCR擴(kuò)增目標(biāo)基因序列,結(jié)合測(cè)序...
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多參數(shù)生化樣品自動(dòng)處理分析儀(Multi-parameterBiochemicalProcessinganalyzer,MBP)是一種對(duì)生化樣品進(jìn)行自動(dòng)預(yù)處理以及檢測(cè)分析的儀器。生化樣品預(yù)處理及檢測(cè)是科研工作中的重要組成部分和獲取支撐數(shù)據(jù)的核心環(huán)節(jié),而傳統(tǒng)的通過離心、稀釋、滴定、比色等人工樣品處理、檢測(cè)的方式,依賴大量的人工重復(fù)勞動(dòng),還存在著時(shí)效性差、平行性差,由于大量人工操作誤差的引入導(dǎo)致數(shù)據(jù)真實(shí)性難以保證的問題。在測(cè)定過程中所有機(jī)械步驟均由微處理器根據(jù)已設(shè)定的程序進(jìn)行工作...
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高通量微升級(jí)液滴培養(yǎng)組學(xué)系統(tǒng)是基于液演微流控技術(shù)開發(fā)的微型化高通量單細(xì)胞培養(yǎng)及分選裝備,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)環(huán)境菌群在單細(xì)胞水平上進(jìn)行分離培養(yǎng),并分選保存至多孔板中,形成雙重備份。單次運(yùn)行實(shí)現(xiàn)可以處理約5000個(gè)液滴(500個(gè)單克?。?,液滴生成后存儲(chǔ)于高透氣性管路中進(jìn)行孵育(0-3天),最后通過光學(xué)信號(hào)(OD、熒光、化學(xué)發(fā)光等)進(jìn)行檢測(cè)分選,分選后的液滴進(jìn)入多孔板中并且可以形成雙重備份。核心操作流程:步驟1:液滴生成將樣品與培養(yǎng)液分別注入芯片進(jìn)樣口,啟動(dòng)液滴生成模塊;控制液滴體積為1-...
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發(fā)酵過程監(jiān)控系統(tǒng)的精準(zhǔn)度直接決定生產(chǎn)質(zhì)量,而校準(zhǔn)是維持這一精準(zhǔn)度的核心環(huán)節(jié)。忽略校準(zhǔn)可能導(dǎo)致pH、溶氧等關(guān)鍵參數(shù)偏差,進(jìn)而造成產(chǎn)物yield下降甚至批次報(bào)廢。?pH傳感器是較易漂移的部件,每次使用前需用標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)。先用pH7.00標(biāo)準(zhǔn)液定位,再用pH4.00或9.18緩沖液斜率校準(zhǔn),確保讀數(shù)偏差≤0.02pH。若校準(zhǔn)后仍不穩(wěn)定,需檢查電極膜是否破損,或用0.1mol/L鹽酸浸泡2小時(shí)去除蛋白污染。建議每批次生產(chǎn)前校準(zhǔn)1次,連續(xù)運(yùn)行時(shí)每72小時(shí)復(fù)校。?溶氧電極校準(zhǔn)需分兩步:...
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細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)在運(yùn)行中,污染和增殖緩慢是較困擾研究者的兩大問題,需通過精準(zhǔn)排查找到根源并針對(duì)性解決。?污染防控需建立全流程屏障。細(xì)菌污染常表現(xiàn)為培養(yǎng)基渾濁、pH驟降,此時(shí)應(yīng)立即丟棄污染細(xì)胞,用75%酒精消毒培養(yǎng)箱內(nèi)壁,更換濾膜和托盤水槽中的滅菌水。真菌污染多呈白色絮狀漂浮物,需用含氯消毒劑擦拭培養(yǎng)系統(tǒng)表面,并用紫外線照射培養(yǎng)箱30分鐘以上。支原體污染隱蔽性強(qiáng),可通過PCR檢測(cè)確認(rèn),一旦發(fā)現(xiàn)需使用支原體清除劑處理,或直接更換新的細(xì)胞系,同時(shí)對(duì)所有耗材進(jìn)行121℃高壓滅菌(至少20...
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藥物篩選是新藥開發(fā)過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),旨在從大量化合物中篩選出具有潛在治療效果的候選藥物。傳統(tǒng)的藥物篩選方法通常基于細(xì)胞群體的反應(yīng),但這種方法無法準(zhǔn)確反映單個(gè)細(xì)胞的異質(zhì)性和復(fù)雜性。近年來,單細(xì)胞打印技術(shù)的出現(xiàn)為藥物篩選帶來了新的機(jī)遇,能夠更精確地評(píng)估藥物對(duì)單個(gè)細(xì)胞的影響,提高藥物篩選的效率和準(zhǔn)確性。首先,該技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)高通量的單細(xì)胞分離和定位。通過精密的打印設(shè)備,研究人員可以將單個(gè)細(xì)胞精確地打印到特定的位置,形成單細(xì)胞陣列。這種高通量的單細(xì)胞分離和定位能力使得研究人員能夠在短時(shí)...
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隨著氣候環(huán)境的不斷變化,干旱、高鹽、異常溫度等非生物逆境以及病原菌侵襲等生物逆境,嚴(yán)重威脅著植物的生長(zhǎng)發(fā)育與農(nóng)作物產(chǎn)量。在菌群研究領(lǐng)域,探究植物-微生物互作提升逆境耐受性的分子機(jī)制,正成為具有潛力的新方向。?植物與微生物之間存在著復(fù)雜而精妙的互作關(guān)系。當(dāng)植物遭遇逆境時(shí),根系會(huì)分泌特定的信號(hào)分子,吸引有益微生物在根際聚集。這些有益微生物,如根瘤菌、叢枝菌根真菌等,通過多種分子機(jī)制幫助植物抵御逆境。一方面,它們能夠合成植物激素,如生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素等,調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育,增強(qiáng)植物...
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在植物誘變育種與基礎(chǔ)研究領(lǐng)域,揭示突變發(fā)生的規(guī)律和分子機(jī)制是提升育種效率、解析基因功能的核心。全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWAS)作為一種強(qiáng)大的研究工具,能夠系統(tǒng)性地挖掘植物基因組中的突變熱點(diǎn)區(qū)域,為植物遺傳學(xué)研究提供關(guān)鍵線索。?植物在物理輻射、化學(xué)試劑或生物因素誘導(dǎo)下,基因組會(huì)發(fā)生隨機(jī)突變。但研究發(fā)現(xiàn),突變并非均勻分布,而是在某些區(qū)域集中出現(xiàn),形成“突變熱點(diǎn)”。這些熱點(diǎn)區(qū)域可能與DNA序列特征(如高GC含量、重復(fù)序列)、染色質(zhì)狀態(tài)(開放染色質(zhì)區(qū)域更易突變)或DNA修復(fù)機(jī)制的差異相關(guān)...
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